聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的化学聚合和光聚合有什么不同

化学聚合是通过化学催化剂（过硫酸铵），四甲基乙二胺（TEMED）作为加速剂催化聚合作用形成的三维空间的高聚物；而光聚合的催化剂是核黄素，在恒量氧存在下，核黄素光解形成无色基再被氧氧化成自由基，激活单体发生聚合。

光聚合形成的孔径较大，且不稳定，适合制备大孔径的浓缩胶。

简述聚丙烯酰胺凝胶聚合的原理,如何调节凝胶的孔径

聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶为载体的一种区带电泳。该凝胶由丙烯酰胺（Acr）和交联剂N，N—甲叉双丙烯聚酰胺（Bis）聚合而成。聚丙烯酰胺凝胶电泳利用电泳和分子筛的双重作用分离物质。 Acr和Bis单独存在或混合在一起时是稳定的，但在具有自由基团体系时就能聚合。引发自由基团的方法有化学法和光化学法两种。

化学法的引发剂是过硫酸胺（Ap），催化剂是四甲基乙二胺（TEMED）；光化学法是以光敏感物核黄素来代替过硫酸胺，在紫外光照射下引发自由基团。

采用不同浓度的Acr、Bis 、A p、TEMED使之聚合，产生不同孔径的凝胶。因此可按分离物质的大小，形状来选择凝胶浓度。

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理是什么

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）是一种常用的蛋白质分离和分析技术，其原理如下：

1. 去除蛋白质的电荷影响：首先将待分离的蛋白质样品加入SDS（十二烷基硫酸钠）缓冲液中，在高温条件下进行加热，使蛋白质分子中的碳-硫键断裂，同时SDS与蛋白质中极性氨基酸作用形成带负电的复合物。这样处理后，所有蛋白质都被均匀地包覆在SDS分子上，使得所有蛋白质分子的电荷密度相同，相互之间不再受到电荷的干扰。

2. 蛋白质分子按大小排列：将经过SDS处理的蛋白质样品通过小孔电泳进入聚丙烯酰胺凝胶中，凝胶中有许多微小孔隙，蛋白质分子会根据它们的大小而在凝胶中形成不同深度的通道，分子量越大，越难通过孔隙，从而相应地在电泳中移动速度越慢。凝胶中的孔隙大小可以通过改变聚合物浓度、交联剂和缓冲液pH等方式进行调节。

3. 可视化分析：经过电泳后，蛋白质样品被分离到不同的位置，可以通过染色或Western blotting等方法对蛋白质进行定性和定量分析。通常会使用一些专门针对特定蛋白质的抗体，将其与蛋白质结合，并用荧光或酶标记物来检测分离出的蛋白质。

聚丙烯酰胺凝胶电泳显色液显色时间

聚丙烯酰胺凝胶电泳显色时间至少一个小时，一般都是染色至饱和再洗脱。没有过度染色的文图去。

polyacrylamide gel 跑的话一般160V2块gel要4-5个小时，等溴酚蓝指示剂快要出去的时候就可以染色了，如果有4度跑的话可以放到250-380V，1.5个小时就够了，可以自己试着去摸索一下条件的。各个实验室是有差异的。

连续聚丙烯酰胺凝胶电泳,不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳定义

带有浓缩胶和分离胶两部分的是不连续系统，只有分离胶的就是连续系统。